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纤维素酶的二步分离纯化新工艺     纤维素酶  滤纸  纯化  亲和         2007/12/13
以普通定性滤纸为底物 ,经碱处理后 ,研究其对纤维素酶的亲和吸附作用。结果表明 ,普通定性滤纸对纤维素酶具有比较强的特异性吸附作用 ,能够从粗酶液中分离出纤维素酶 ,再经POROS 2 0HQ阴离子交换柱纯化后即可得到电泳纯的纤维素酶。该法大大简化了传统的纤维素酶纯化工艺 ,所得的纤维素酶活力极高 ,比活达 35 0U/mg以上 ,滤纸一步吸附后纤维素酶的纯化倍数为 9 5 5 ,活性回收率在 1...
丙烯酶催化氧化制环氧丙烷反应产物的气相色谱分析。
高效液相色谱法测定酶的活性          2007/12/13
高效液相色谱法测定酶的活性
固定化酶反应器在高效液相色谱分析中的应用。
本文开发了一个用强阴离子高效液相色谱分离纯化α-淀粉酶的的新方法。详细讨论了纯比的最佳条件*在给定的条件下纯化工业α-淀粉酶,其活性回收率达96%,比活性为388u/mg蛋白,纯化倍数提高30倍,经SDS-PAGE分析,得到分子量分别为58K和33K两条α-淀粉酶谱带。此法纯化α-淀粉酶简单,快速,效率高。不仅能纯化工业粗酶,也可纯化其它来源的α-淀粉酶。
首次采用以改性纤维素为基质、亚氨二乙酸(IDA)为取代配基的铜离子螯合膜色谱法对牛肝过氧化氢酶(BLC)的分离纯化进行了研究。缓冲液的pH值对BLC与螯合配基的结合影响显著。在选定的色谱条件下,BLC粗酶液经IDA型Cu2+-螯合膜色谱柱一步纯化,比活性平均提高4.7倍,回收率为67.7%。金属螯合膜色谱柱可用含0.2mol/L的咪唑或50mmol/LEDTA-1mol/LNaCl的缓冲液再生,反...
首次应用高压凝胶过滤色谱和中压阴离子交换色谱提纯胃蛋白酶原,得到抗原PGⅠ和PGⅡ,一次提纯仅需50min。与以往文献报道的胃蛋白酶原纯化方法相比,具有简易、快速、高效的特点。
建立了监测葡萄糖异构酶在不同浓度变性剂中构象变化过程的高效液相色谱法。葡萄糖异构酶在天然条件下,以四聚体形式存在,在不同变性剂的不同浓度下,会解聚成二聚体或单体,或整体结构变松散,而且葡萄糖异构酶的活性随着构象的变化也会有相应的变化。
采用高效液相色谱紫外检测法测定人体红细胞中儿茶酚氧位甲基转移酶 (COMT)的活性。以 3,4 二羟基苯甲酸 (DBA)作为酶反应底物 ,S 腺苷甲硫氨酸 (SAM)作为甲基供体 ,在镁离子的存在下 ,将SAM上的甲基转移到DBA 3位的氧上。色谱法测定反应产物 4 羟基 3 甲氧基苯甲酸 (4 OH 3 MBA)的生成量。人体红细胞中COMT活性的线性范围在 1U/mL~ 6 0U/mL ,最低...
高效液相色谱法测定酶转化液中胞苷三磷酸及其相关物质。
壳聚糖是一种重要的生物医用材料,脱乙酰度是影响其生物降解性能的重要因素。运用凝胶渗透色谱研究了脱乙酰度及相对分子质量分布 相似、而聚合单元N-乙酰氨基-D-葡萄糖和D-氨基葡萄糖分布不同的两种壳聚糖材料在溶菌酶作用下的降解过程,分析检测了壳聚糖材料在降解 过程中的重均相对分子质量、相对分子质量多分散性和相对分子质量分布的变化。发现聚合单元为随机分布的壳聚糖样品,其降解是均匀的; 而聚合单元为段状分...
建立了应用毛细管胶束电动色谱 (MECC)灵敏、快速的测定血管紧张素转化酶 (ACE)活性的方法。通过对电压、上样时间、电极缓冲液体系等影响因素的优化 ,探讨了方法的可行性 ,确立了最佳测定条件 (电压 :8 1kV ;上样时间 :1s;电极缓冲液 :2 0mmol/L硼酸盐缓冲液 (pH 9 0 ,含 5 0mmol/LSDS) ;检测波长 :2 2 8nm)。方法的最低ACE活性检测限为 5p...
可溶性丝素粉末经碱性蛋白酶Alcalase水解后 ,其酶解产物对血管紧张素转化酶 (ACE)的活性有很强的抑制作用。采用凝胶过滤色谱SephadexG 15和反相高效液相色谱 (RP HPLC)对水解度为 2 0 %的酶解产物进行分离纯化 ,利用质谱鉴定其中一种ACE抑制剂是肽 ,其结构为Gly Tyr。
通过高效液相 /示差折光检测系统 (HPLC/RI)分析可获得细菌D 97利用糊精或淀粉水解物合成海藻糖的基本生物学信息 ,包括微生物培养碳源对细菌D 97胞内海藻糖合成酶系的影响以及该酶系利用不同种类或不同分子链长度的麦芽寡糖合成海藻糖的能力及作用过程。采用HPLC与RI及电喷雾电离质谱 (ESI MS)联用并结合其他生物学手段对由细菌D 97获得的纯酶组分 (酶A)作用产物进行定量和定性分析 ...
采用分步高效液相色谱法首次从菠菜核酮糖双磷酸羧化酶(英文缩写为Rubisco)的胃蛋白酶-胰酶复合酶水解产物中分离纯化了血管紧张素转换酶(ACE)活性抑制肽。水解产物经ODS柱分离得到活性组分,这些活性组分再依次经过氨基柱(PhA) 氰基柱(CN)和硝基苯乙基柱(NPE)4种色谱柱分离后,得到4种高度纯化的具有抑制ACE活性的多肽。经蛋白质序列自动分析仪测定,4种多肽的结构分别为MRWRD,MR...

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