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基于酵母乙酰羟酸合成酶(AHAS)与磺酰脲类抑制剂复合物的晶体结构, 用分子对接方法对AHAS与5个磺酰脲类抑制剂相互作用的方式进行了系统的分子对接研究. 晶体复合物对接和假复合物对接两种模式对接的结果基本相同, 并与实验结果吻合. 在进一步的对接中逐级考虑了辅酶FAD和TPP的影响, 结果表明, 辅酶FAD和TPP的加入, 对AHAS酶与磺酰脲类抑制剂的结合顺序基本没有影响. 其中FAD的加入使...
设计合成了一种发夹型核酸适体(Aptamer), 结合聚合酶反应建立了蛋白质荧光分析新方法. 该核酸适体同时作为蛋白质配体和聚合反应模板, 与靶蛋白特异结合后, 其构象发生了变化, 启动聚合反应, 从而在未直接标记核酸适体的情况下, 通过监测聚合反应进程来检测蛋白质的浓度. 采用该方法检测凝血酶的线性范围为0.5~8 nmol/L, 检测下限为0.5 nmol/L, 为蛋白质检测提供了一种简便快...
将荧光猝灭基团修饰的17E脱氧核酶(17E DNAzyme)与荧光基团修饰的底物链通过6个脱氧核苷酸相连, 得到了一种新型的对Pb2+敏感的荧光探针. 由于DNAzyme与底物链发生分子内杂交, 荧光基团与猝灭基团相互靠近, 导致荧光猝灭. 当Pb2+存在时, DNAzyme被激活, 底物链被切断后释放出荧光基团标记的DNA片段, 从而产生明显的荧光信号. 据此可在常温下快速检测Pb2+, 检测...
根据万古霉素对产物的荧光具有猝灭作用的原理, 本文研究了万古霉素的荧光猝灭机理, 建立了测定万古霉素的方法. 该方法具有操作简便、快速及选择性好等优点, 可用于注射液中万古霉素含量的测定, 与药典法对照, 结果令人满意.
在分子水平上较为详尽地研究了85个磺酰脲类化合物与植物源野生型拟南芥AHAS酶的离体相互作用, 测定了这些化合物对AHAS酶的抑制常数Kiapp. 采用比较分子力场方法(CoMFA)对这些化合物与AHAS酶的相互作用进行了三维构效关系研究, 用此模型预测了检验组10个化合物的pKiapp值, 模型的预测结果与测试结果一致.
采用高效化学发光试剂3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-羟基)苯-1,2-二氧杂环丁烷磷酸(AMPPD)作为检测底物, 并将传统的ELISA两步双抗夹心法改为一步法, 得到了高灵敏测定人血清中心肌肌钙蛋白I(cTnI)的化学发光酶免疫分析优化条件. 采用单因素变化法和方阵滴定法得到的最佳实验条件为: 捕获抗体包被浓度为10.0 μg/mL, 以pH=7.0的PBS作为免疫反应缓冲底液...
以邻氨基苯甲酸(Abz)为荧光发射基团、2, 4-二硝基苯基乙二胺(Eddnp)为荧光猝灭基团, 设计合成了SARS-CoⅤ 3CL蛋白酶的新型荧光多肽底物: H2N-E(Eddnp)STLQSGLK(Abz)-CONH2. 用液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术进行了表征, 表明该多肽底物能被SARS-CoⅤ 3CL蛋白酶识别, 并在QS之间被专一性酶解. 另外, 利用该多肽底物的荧光共振能量...
用荧光光谱法研究了芹菜素(Quercetin)、木犀草素(Luteocin)、槲皮素(Quercetin)与溶菌酶的相互作用, 对比了C3'—OH和C3—OH取代对黄酮与溶菌酶作用的影响. 结果表明, C3'—OH可大大增强黄酮与溶菌酶之间的作用, C3—OH的取代则导致作用力减弱. 根据3种黄酮的结构参数, 初步分析了C3'—OH和C3—OH取代对黄酮与蛋白相互作用的影响.
以作用于鼠肝脏细胞的21个3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂(RI)为训练集, 训练集化合物具备结构多样性, 来源于相同药理模型, 活性值IC50范围在0.3-8000 nmol·L-1. 利用Catalyst 计算HMG-CoA还原酶抑制剂最优药效团由一个氢键受体, 一个氢键给体, 一个疏水基团和一个芳香环特征组成. 药效团模型Fixed cost值, Total co...
以透明质酸(HA)为谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的酶模型,将碲(Te)引入HA中,成功地合成了一种新的高活力的模拟酶——碲化透明质酸(TeHA). 用红外光谱和核磁共振光谱对TeHA的结构进行研究,证明Te的修饰位点位于HA的N-乙酰氨基葡萄糖的–CH2OH. 采用Wilson辅酶偶联法测定了TeHA催化还原型谷胱甘肽(GSH)还原H2O2的GPX活力为163.6 U/μmol. 与文献报道的其他...
以离子液体为溶剂,考察了溶剂类型、水活度、温度、pH、共溶剂等因素对酶促拆分外消旋烯丙酮醇的影响,并与常用于消旋烯丙酮醇拆分的有机溶剂乙酸乙烯酯作为对照进行了比较。结果表明在离子液体[BMIM][PF6]中脂肪酶的催化性能较好,酶在其中的初始速率为18.48 μ mol•g-1•min-1,半衰期为5.25 h ,相应高于在乙酸乙烯酯中的9.18 μmol g-1min-1...
在无溶剂及二(2-乙基己基)丁二酸酯磺酸钠(AOT)/异辛烷/磷酸盐缓冲液微乳液体系中,研究了黑曲霉脂肪酶催化的红花油水解反应的动力学。结果表明,无溶剂及微乳液中的反应活化能分别为32205J·mol-1和7391J· mol -1。酶在无溶剂体系中的热稳定性高于微乳液中。在无溶剂及微乳液中的表观米氏常数分别为0.135 mol·L-1和0.101 mol·L-1。在两种体系中,乙醇对水解反应均表...
摘要 提出了一种新的酶固定化方法, 即通过甲醇处理, 使蚕丝素蛋白膜的构象由random coil向β-sheet发生根本性的变化, 从而将酶固定在β-sheet所特有的分子间氢键中。利用此方法所制成的脲酶电极, 在合适的操作条件下, 各项响应指标均令人满意, 并且脲酶的耐温性能被大大提高, 电极的有效使用寿命长达三个月以上。此种酶固定化方法原则上能够应用于其他不破坏蚕丝素蛋白分子结构的可溶性酶。...
摘要 以N-乙酰-L-苯丙氨酸乙酯和L-亮氨酰胺、L-丙氨酰胺、L-苯丙氨酰胺 、L-缬氨酰胺等L-氨基酰胺为底物,以游离或膜固定化脂肪酶为催化剂,在水、 有机溶剂单相和水-有机相双相体系反应介质中,合成了N-乙酰-L-苯丙氨酰基 -L-亮氨酰胺、N-乙酰-L-苯丙氨酰基-L-丙氨酰胺、N-乙酰-L-苯丙氨酰 基-L-苯丙氨酰胺、N-乙酰-L-苯丙氨酰基-L-缬氨酰胺等二肽。研究证明, 由于反应和...
摘要 综述了一氧化氮合酶的结构、功能和催化路径, 讨论了诱导型一氧化氮合酶的结构和功能的关系以及加氧氧化的机理.

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