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北柴胡UGT基因的克隆及其过量表达和RNAi转基因载体的构建
北柴胡 UGT基因 转基因载体
2012/3/20
克隆北柴胡中可能参与柴胡皂苷生物合成的UGT基因,构建其过表达和抑制表达的转基因载体,为通过转基因验证其功能奠定基础。 方法: 在454高通量测序已获得部分cDNA序列基础上,通过RACE和LD-PCR方法扩增全长cDNA克隆。设计含有酶切位点的PCR引物,PCR扩增UGT基因的ORF和部分片段后,酶切,分别插入到pCAMBIA-SUPER,1 300和pHANNIBAL中。重组的pHANNIBA...
新型阳离子聚合物作为基因载体的研究进展
解脂假丝酵母 连续发酵 氨基酸 比生长速率
2012/3/31
高效、低毒、靶向性的基因载体是基因治疗成功的关键。与病毒载体相比，非病毒载体具有毒性低、免疫原性小、结构改造可实现基因靶向递送、易于生产、可重复应用等优点，其中阳离子聚合物是非病毒载体研究热点之一。本文从基于降低细胞毒性、提高稳定性和转染效率、实现靶向转运等进行的聚合物结构改造策略方面综述了多聚赖氨酸、聚乙烯亚胺、聚甲基丙烯酸酯等阳离子聚合物作为基因载体的研究进展。
本文将活化的尿刊酸(urocanic acid，UA)与壳聚糖(chitosan，CTS)上的氨基反应合成一种新型非病毒基因载体——尿刊酸偶联壳聚糖(urocanic acid-coupled chitosan，UAC)，通过红外(FT-IR)、核磁共振(1H NMR)和元素分析对UAC结构进行确证。用正交实验对取代度的影响因素进行考察，结果表明，随着UA投料量的增加和活化时间的延长，UAC的取代...
研究粒径对壳聚糖(chitosan，CS)纳米粒介导的转染效率的影响。通过调整CS溶液加入质粒基因(plasmid DNA，pDNA)溶液的速度和涡旋时间制备250，580和1 300 nm粒径pDNA/CS纳米粒，研究粒径对CS介导的细胞转染效率的影响。为深入探讨粒径对转染效率的影响，考察了3种粒径pDNA/CS纳米粒的药剂学性质，对抗核酸酶作用和细胞对纳米粒的吸附和摄取行为。结果表明：本文制备...
葡聚糖-精胺阳离子聚合物基因载体体外基因转染的研究
葡聚糖-精胺阳离子聚合物 复合物 转染率
2009/11/23
本文研究了葡聚糖-精胺阳离子聚合物(DSP)基因载体的性能及其对体外细胞基因的转染效率。氧化葡聚糖与精胺通过还原胺化法反应制得DSP，所得DSP与质粒pEGFP通过静电吸附形成复合物；当DSP/DNA质量比在4∶1至20∶1，能形成稳定的复合物，复合物粒径为162.6～187.9 nm，zeta电位则从+8.45 mV增至+39.6 mV；DSP能有效保护DNA不受核酸酶I降解，同时在一定pH范围...
壳聚糖及其衍生物作为基因载体的研究进展
壳聚糖 基因载体 进展
2013/10/23
壳聚糖对DNA 有很好的结合和保护作用, 对生物体无毒、相容性好, 本身具有一定的抑制微生物和抗癌作用, 可通过复凝聚法制备, 而且还很容易改性制成不同途径给药的基因治疗载体. 该文介绍壳聚糖及其衍生物近年来作为基因载体的研究进展, 总结壳聚糖基因载体的制备 方法 、作用机制、转染效率的影响因素及改进 方法 和需解决的问题. 壳聚糖基因载体是一种新型基因载体, 具有广阔的发展前景.
壳聚糖基因载体增强CpG-ODN免疫活性研究
基因载体 含CpG序列的寡脱氧核苷酸（CpG-ODN） 免疫活性
2013/10/15
应用壳聚糖（CS）包载含CpG序列的寡脱氧核苷酸（ODN），制备CS CpG-ODN基因载体，并研究其免疫活性。方法 采用复凝法制备CS Cp-ODN基因载体。24只小鼠随机分为4组，每组6只，包括对照组、CS组、CpG-ODN组和CS CpG-ODN组，均通过后大腿肌内注射进行免疫接种。用MTT法检测淋巴细胞增殖情况，ELISA方法检测血清中IgG、IL-2和IL-12水平，流式细胞仪检测外周血...
基因载体可有效预防人禽流感——中山大学肿瘤防治中心黄文林教授相关研究取得重大进展
中山大学 人禽流感 病毒基因
2005/11/25
中山大学肿瘤防治中心黄文林教授花费三年时间研制出一种病毒基因载体携带病毒干扰基因，能够有效地防治人禽流感的传播。目前实验已取得突破性进展，在动物身上获得实验成功，年底将上报国家有关部门批准，不久将有望用于临床试验。